
一、试剂介绍
Alexa Fluor 700 WGA (AF 700 WGA) 的应用比 AF 680 WGA 更广,尤其是在当前的主流成像平台和复杂实验中。
下面进行详细分析,解释为什么AF 700更具优势。
核心原因:发射波长与仪器兼容性
两者的本质区别在于荧光染料的发射波长:
AF 680 WGA: 发射峰在 ~702 nm,处于近红外(NIR)区边缘。
AF 700 WGA: 发射峰在 ~719 nm,更深入近红外(NIR)区。
这个看似微小的波长差异,导致了巨大的应用兼容性差异,主要体现在以下关键领域:
1. 流式细胞术:这是决定应用广度的最重要因素
现代高端流式细胞仪(如Beckman CytoFLEX S, BD FACSymphony, Cytek Aurora)普遍配置了标准的激光器和检测滤光片组合。
标准配置: 绝大多数配置了 640 nm红色激光器 的仪器,都会标配 “APC通道”(通常检测660/20 nm) 和 “APC-Cy7/Alexa Fluor 700通道”(通常检测712.5/25 nm 或 730/45 nm)。
展开剩余74%关键结论:
AF 700 完美匹配标准化的 “APC-Cy7/AF700”检测通道,可以直接使用,无需特殊配置。
AF 680 的发射光谱(702 nm)介于APC通道和APC-Cy7通道之间。它在这两个通道中都会有较强的信号溢出(Spread),需要进行非常复杂的、通常效果不佳的荧光补偿,严重挤占其他荧光通道,极大地限制了它在多色流式面板中的应用。
因此,在流式细胞术这个最大应用场景中,AF 700是近乎标准的选择,而AF 680极少被用于设计严谨的多色实验。
2. 活体成像与小动物成像
两者都属于近红外染料,组织穿透力好、背景荧光低。
AF 700 的波长更长一点,穿透力略优,自发荧光背景略低,因此图像的信噪比理论上更好。
更重要的是,小动物活体成像系统(如IVIS, Bruker, PerkinElmer系统)的滤光片组通常以700 nm, 750 nm, 800 nm等为中心设置,AF 700能更好地匹配这些标准滤光片。
3. 荧光显微成像
共聚焦显微镜: 标准配置的640 nm激光器通常配有多个长通或带通检测器。AF 700的信号可以更干净地被长通滤片(如 LP 670 nm)收集,与AF 647等染料更容易区分。AF 680则容易与AF 647信号重叠。
多色成像: 在设计多色免疫荧光实验时,AF 700作为一个远红/近红外通道的标记,可以很好地与AF 488(绿)、AF 555(橙)、AF 647(深红)等染料光谱分离,减少串色。AF 680与AF 647的光谱靠得太近,分离困难。
二、试剂属性
中文名称:小麦胚芽凝集素-Alexa Fluor 700,AF 700标记WGA,AF700标记的小麦胚芽凝集素,红色荧光探针AF 700标记的小麦胚芽凝集素
英文名称:AF 700 WGA/Wheat germ Agglutinin;WGA-Alexa Fluor 700;Wheat Germ Agglutinin-AF 700
纯度:≥95%
外观:固体
品牌:陕西新研博美生物科技有限公司
溶解性:溶于部分有机溶剂以及水
储存条件:-20℃以下冰冻、干燥避光保存,避免反复冻融
规格:1mg,5mg,10mg
三、相关试剂
AF594 NHS,AF594 SE
AF350 WGA,Wheat germ agglutinin-AF350
AF405 WGA
AF430标记小麦胚芽凝集素
AF532 WGA
AF488 WGA
AF546 WGA,AF546标记的小麦胚芽凝集素
AF568 WGA;AF568 Wheat germ agglutinin
AF594 WGA
AF647 WGA
AF660 WGA,Alexa Fluor660 WGA
以上内容均由陕西新研博美生物科技有限公司小G整理完成
该试剂只用于科研实验股票配资门户官网,不能用于人体。
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